Absans epilepside apelinin rolü

Abstract

ÖZET Epilepsi yaygın bir sağlık problemidir. Epilepsi tek bir bozukluk olmaktan öte altta yatan çeşitli hastalıkların sendromlarının bir grubudur. Epilepside inflamatuar sistemin aktivasyonunun ve proinflamatuar sitokinlerin aşırı üretiminin epilepsinin patofizyolojisinde rol oynadığını bildiren birçok delil literatürde bulunmaktadır. Son veriler Apelinin immun yanıtların düzenlenmesine katkı sağladığını hatta immunoregülatör olabileceğini göstermektedir. İki aşamalı olan bu çalışmanın ilk basamağında, absans epilepsinin poligenetik sıçan modeli olan Wistar Albino Glaxo/Rij (WAG/Rij) sıçanların farklı dokularında Apelin ve sitokin ekspresyonunun değişimlerinin belirlenmesi, Apelin düzey değişimlerinin beyin dokusunda inflamatuar süreç değişimleriyle olan ilişkisinin saptanması amaçlanmaktadır. İkinci aşamada ise 6 aylık WAG/Rij sıçanlarda, Apelin uygulaması öncesi ve sonrasında alınan elektroensefalogram (EEG) kayıtlarının değerlendirilmesi amaçlanmaktadır. Ayrıca planlanan bu çalışmada, Apelin-12 uygulamasının absans epilepsinin gelişmesindeki etki mekanizmalarını; inflamatuvar süreçler, Nükleer Faktör kappa B (NFkB) ve mitojen aktive edici protein kinaz (MAPK) aktivasyonu ve apoptotik belirteçler açısından değerlendirildi. Apelin 12‟nin, apoptozis ve inflamasyon ile ilişkili hücre içi sinyal yollarının, sitokinlerin düzeyleri Enzime bağlı immünosorbent testi (ELISA) yöntemiyle beyin dokularında ve serumda saptandı. Verilerin konfirmasyonu western blot ve immunohistokimya ile desteklendi. Apelin-12 uygulamasının belirgin bir biçimde tümör nekrozis faktör alfa (TNF-α) ve interlökin (IL-6) gibi proinflamatuar sitokinleri ve NFkB‟yi beyinde azallttığını, EEG‟de diken dalga deşarjları (DDD)‟lerin sayı ve sürelerini düşürdüğünü sonuçlarımız gösterdi. Üstelik WAG/Rij sıçanlarda Apelin-12 uygulanımının NFkB miktarını azalttığı western blot yöntemi ile de teyit edildi. Sonuçlarımız ile WAG/Rijsıçanlarda Apelin-12‟nin hem antiinflamatuar hem de antikonvulsan etkilerinin altında yatanönemli bir mekanizmanın fosfotidilinositol-3-kinaz (PI3K)/Akt aracılı NFkB aktivitesinin olabileceği önerilebilir. Anahtar Kelimeler: Apelin, WAG/Rij sıçan, Absans Epilepsi, İnflamasyon

ABSTRACT Epilepsy is a common health problem. Epilepsy is not a single disorder but rather a group of syndromes with a variety of underlying diseases. There have been alot of evidence reported in the literature that epilepsy is accompanied by the activation of the inflammatory system, and overproduction of pro-inflammatory cytokines may play a role in the pathophysiology of epilepsy. Current evidence supports that Apelin contributes to regulation of immune responses, and even it might have been a immunoregulator. The focus of the proposed project was 1) in the first step of this study; to determine the changes of Apelin-12 and cytokine expression in the different tissues of polygenetic rat model of absence epilepsy in the Wistar Albino Glaxo/Rij (WAG/Rij) rats, the relationship between changes of inflammatory processes and Apelin-12 levels, 2) in the second step of this study; to nvestigate electroencephalogram (EEG)recordings at before and after Apelin-12 administration in WAG/Rij rats. Also, planned this study will determine the efficiency of mechanisms in in the development of absence epilepsy; inflammatory processes, Nuclear Factor kappa B (NFkB) and mitogen-activated protein kinase (MAPK) activation and apoptotic markers. Levels of Apelin-12, cytokines associated with apoptosis and nflammation intracellular signaling pathways were detected in the brain and blood tissue via enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Data confirmation was supported by western lot and immunohistochemistry. The results showed that treatment with Apelin-12 markedly creased proinflammatory cytokine, such as tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and interleukin (IL)-6 levels in brain, and significantly decreased the number and duration of pike-and-wave discharges (SWDs) in EEG, and NFkB activity in WAG/Rij rats. Furthermore, Western blotting and ELISA analysis results demonstrated that administration f Apelin-12 reduced the amount of NFkB in WAG/Rij rats. Our results may suggest that reduction of phosphotidilinositol kinases (PI3K)/Akt related NFkB activity is a crucial mechanism underlying the both antiinflammatuar and anticonvulsant effects of Apelin-12 in WAG/Rij rats. Key Words: Apelin, WAG/Rij rat, Absence Epilepsy, Inflammation